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Transwell Assay两种版本的细节

• 在Transwell assay中，invasion（侵袭性）和migration（迁移性） 是两个经常被测试的细胞功能，它们虽然相关，但有明显的区别：
• Migration（迁移性）指的是细胞在二维平面上或通过一种基质（如胶原蛋白）移动的能力。这种功能常用于评估细胞对化学梯度的响应能力，比如在炎症、细胞修复或癌症细胞扩散中的情况。在Transwell迁移实验中，细胞层种植在孔隙率适中的膜上，只需基质膜即可。
• Invasion（侵袭性）则是更复杂的过程，涉及细胞穿过细胞外基质或组织屏障的能力。这是评估肿瘤细胞侵袭性的关键实验。在侵袭性测试中，Transwell的膜会预先涂覆一层基质蛋白（如基质胶原蛋白或基质明胶），模拟组织的基底膜，考验细胞穿透这层基质的能力。
• 实验步骤
  • 对于迁移性测试：
  1. 在Transwell的上室添加细胞悬液。
  2. 在下室添加诱导剂（如含有生长因子的培养基），设置化学吸引梯度。
  3. 孵化一定时间后（通常24-48小时），使用棉签移除上室的非迁移细胞。
  4. 将迁移到下室膜的细胞进行染色并计数。
  • 对于侵袭性测试：
  1. 将Transwell的膜涂覆一层基质蛋白（如Matrigel）。
  2. 在上室添加细胞悬液。
  3. 同样在下室添加含有诱导剂的培养基。
  4. 孵化一定时间后（通常24-72小时，因涂层而异），使用棉签移除上室的非侵袭细胞。
  5. 染色并计数已侵袭到下室膜的细胞。